在掃描電鏡（SEM）中進(jìn)行低溫樣品成像（也稱為冷凍SEM或Cryo-SEM）可以有效保留樣品的原始結(jié)構(gòu)和水分狀態(tài)，尤其適用于生物樣品、聚合物和其他對溫度敏感的材料。以下是詳細(xì)的步驟和方法來進(jìn)行低溫樣品成像：

1. 樣品制備

快速冷凍

高壓冷凍：使用高壓冷凍儀將樣品迅速冷凍至液氮溫度（-196°C）以下，以防止冰晶形成。

浸入冷凍：將樣品快速浸入液氮或液氦中冷凍。

樣品固定

固定樣品：將冷凍的樣品固定在冷凍樣品架上，確保樣品與樣品架緊密接觸，減少熱傳導(dǎo)。

樣品處理（可選）

冷凍斷裂：對于需要觀察內(nèi)部結(jié)構(gòu)的樣品，可以進(jìn)行冷凍斷裂處理。在冷凍狀態(tài)下將樣品劈開，暴露出內(nèi)部結(jié)構(gòu)。

冷凍替換：用有機(jī)溶劑（如丙酮或甲醇）替換樣品中的水分，然后冷凍干燥。這種方法可以減少冰晶形成，適合某些特殊樣品。

2. 低溫轉(zhuǎn)移

冷凍轉(zhuǎn)移系統(tǒng)

使用冷凍轉(zhuǎn)移系統(tǒng)：將冷凍樣品從冷凍裝置轉(zhuǎn)移到SEM的冷凍樣品室中。冷凍轉(zhuǎn)移系統(tǒng)通常包括冷凍樣品盒和冷凍轉(zhuǎn)移桿，確保樣品在低溫環(huán)境下轉(zhuǎn)移，避免升溫和冰晶形成。

3. 冷凍SEM系統(tǒng)設(shè)置

安裝冷凍樣品室

冷凍樣品室：安裝冷凍樣品室或冷凍臺在SEM中，確保樣品在低溫條件下成像。冷凍樣品室通常帶有冷卻裝置，可以保持樣品在低溫環(huán)境中。

低溫成像設(shè)置

溫度控制：在SEM控制面板中設(shè)置冷凍樣品室的溫度，通常在-150°C到-190°C之間。確保樣品在整個成像過程中保持低溫。

真空度控制：調(diào)整SEM樣品室的真空度，適應(yīng)低溫環(huán)境下的樣品觀測。

4. 成像和數(shù)據(jù)采集

低加速電壓和低束流

低加速電壓：使用低加速電壓（通常在1-5 kV之間）減少電子束對冷凍樣品的損傷。

低束流強(qiáng)度：減少束流強(qiáng)度，避免高能電子束對樣品的加熱和損傷。

實時監(jiān)控

實時監(jiān)控：在成像過程中實時監(jiān)控樣品溫度和真空度，確保樣品始終處于低溫狀態(tài)。

成像和數(shù)據(jù)采集

高分辨率成像：在低溫條件下進(jìn)行高分辨率成像，獲取樣品的詳細(xì)結(jié)構(gòu)信息。

圖像保存：保存和記錄成像數(shù)據(jù)，確保數(shù)據(jù)的完整性和可靠性。

5. 后處理和維護(hù)

樣品后處理

樣品儲存：完成成像后，將樣品儲存在低溫環(huán)境中，防止升溫和結(jié)構(gòu)變化。

樣品處理：根據(jù)實驗需要，對樣品進(jìn)行進(jìn)一步處理或分析。

設(shè)備維護(hù)

定期檢查：定期檢查和維護(hù)冷凍SEM系統(tǒng)，包括冷凍樣品室、冷卻裝置和真空系統(tǒng)，確保設(shè)備正常運(yùn)行。

清潔設(shè)備：定期清潔冷凍樣品室和樣品轉(zhuǎn)移系統(tǒng)，防止污染和損壞。

以上就是澤攸科技小編分享的如何在掃描電鏡中進(jìn)行低溫樣品成像的介紹。更多掃描電鏡產(chǎn)品及價格請咨詢15756003283(微信同號)。